SYNTHESIS, PHYSICAL AND CHEMICAL PROPERTIES AND ANXIOLYTIC ACTIVITY OF 2-(4-(R-ARYLIDENAMINO)-5-METHYL-4H-1,2,4-TRIAZOLE-3-YL)THIO)ACETIC ACIDS AND THEIR SALTS

За оцінками, 50 % всіх молекул лікарських засобів, що використовуються в лікарській терапії, вводять у вигляді солей. Цей факт вказує на те, що утворення солі лікарської речовини є важливим етапом розвитку лікарського засобу. Тому вважаємо, що комбінаторний синтез органічних та неорганічних солей похідних 1,2,4-тріазолу має не лише теоретичну а й практичну значимість. Метою роботи є синтез та встановлення будови нових 2-((4-(R-ариліденаміно)-5-метил-4H-1,2,4-тріазол3-іл)тіо)ацетатних кислот та їх солей, де R – 2Н, 4-диметиламінобензиліден, 2-гідроксибензиліден, 4-гідроксибензиліден, 4-нітробензиліден та вивчення анксіолітичної дії синтезованих сполук. Матеріали та методи дослідження. Фізико-хімічних властивості отриманих сполук досліджували згідно методів, які наведені у Державній Фармакопеї України. Температуру плавлення визначали на автоматичному приладі для визначення температури плавлення OptiMelt Stanford Research Systems MPA100 (виробництво США). Елементний склад сполук встановлено на елементному аналізаторі Elementar Vario EL cube (CHNS) (стандарт – сульфаніламід). Хромато-мас-спектральні дослідження проводили на газорідинному хроматографі Agilent 1260 Infinity HPLC з обладнаним мас-спектрометром Agilent 6120 (іонізація в електро-спреї (ESI), Н ЯМР-спектри реєструвались на спектрометрі «Mercury 400», розчинник DMSO-D6, внутрішній стандарт – тетраметилсилан. Анксіолітичну та анксіогенну активність досліджуваних сполук вивчали в тесті за S. Pellow. Результати досліджень. В якості вихідних речовин використовували 4-(R-ариліденаміно)-5-метил-4H1,2,4-тріазол-3-тіоли, де R – 2Н, 4-диметиламінобензиліден, 2-гідроксибензиліден, 4-гідроксибензиліден, 4-нітробензиліден. Синтез 4-(R-ариліденаміно)-5-метил-4H-1,2,4-тріазол-3-тіолів, де R – 4-диметиламінобензиліден, 2-гідроксибензиліден, 4-гідроксибензиліден, 4-нітробензиліден, проведений додаванням ароматичного альдегіду (4-диметиламінобензальдегіду, 2-гідроксибензальдегіду, 4-гідроксибензальдегіду, 4-нітробензальдегіду) до 4-аміно-5-метил-4H-1,2,4-тріазол-3-тіолу в середовищі ацетатної кислоти та нагріванні до розчинення осаду. Отримання 2-((4-(R-ариліденаміно)-5-метил-4H-1,2,4-тріазол-3-іл)тіо)ацетатних кислот проводили додаванням ароматичного альдегіду до еквівалентної кількості 2-((4-(аміно)-5-метил-4H-1,2,4-тріазол-3іл)тіо)ацетатної кислоти в в середовищі ацетатної кислоти при нагріванні. Висновки. Синтезовано ряд нових 2-((4-(R-ариліденаміно)-5-метил-4H-1,2,4-тріазол-3-іл)тіо)ацетатних кислот. Будову синтезованих сполук встановлено за допомогою сучасних фізико-хімічних методів аналізу. Досліджено деякі фізико-хімічні властивості отриманих речовин. Ключові слова: 1,2,4-тріазол, H ЯМР, синтез, гетероциклічні сполуки


Introduction
Solubility data is used to make the most important decisions from the earliest stages of drug design and throughout the process of their development [1].
In many cases, the physical properties of the pharmaceutical substances need to be modified to achieve the optimal technological characteristics that are suitable for the development of the dosage form. Different strategies are used to change the physical properties of pharmaceutical substances associated with the creation of medicinal products [2].

Formulation of the problem in a general way, the relevance of the theme and its connection with important scientific and practical issues
It is estimated that 50% of all molecules of medicinal products used in drug therapy are administered as salts. This fact indicates that the formation of a salt of a medicinal substance is an important stage in the development of a medicinal product. Medicinal substances often have certain suboptimal physico-chemical or biopharmaceutical properties that can be overcome by creating saline versions of the drug that are developed and implemented after a rigorous research and development program [3].

Analysis of recent studies and publications in which a solution of the problem are described and to which the author refers
To date, a number of salts of derivatives of 1,2,4triazole have been synthesized which exhibit a wide range of biological effects [4,5], low toxicity [6] and have physicochemical properties that simplify the technological features of the creation of new drugs [7].

The field of research considering the general problem, which is described in the article
Therefore, we believe that the combinatorial synthesis of organic and inorganic salts of derivatives of 1,2,4-triazole has not only theoretical but also practical significance.

Materials and methods of research.
The physicochemical properties of the compounds obtained were investigated according to the methods presented in the State Pharmacopoeia of Ukraine. The melting temperature was determined on an OptiMelt Stanford Research Systems MPA100 (US production) automatic melting device. The elemental composition of the compounds is installed on the elemental analyzer Elementar Vario EL cube (CHNS) (standard -sulfanilamide) [8]. Chromatographic mass spectral studies were performed on a gas-liquid chromatograph of Agilent 1260 Infinity HPLC equipped with an Agilent 6120 mass spectrometer (ionization in an electrical spray (ESI), 1H NMR spectra were recorded on a Mercury 400 spectrometer, DMSO-D6 solvent, internal standard -tetramethylsilane.
The anxiolytic and anxiogenic activity of the compounds were studied in the S. Pellow test [9, 10]. The comparison drug gidazepam was administered at a dose of 7 mg / kg [11, 12].
Thus, the acids 4a, 4b and 4d obtained under the action of ammonia hydroxide, sodium and potassium hydroxide in aqueous media were obtained the corresponding salts (5a, 5c-f) ( Table 1, Fig. 5).

Results of the research
The composition and structure of all compounds synthesized by us are determined using elemental analysis and physico-chemical methods of analysis: 1 H-NMR spectroscopy, the HPLC-MS method.
Elemental analysis of compounds was conducted at the Department of Toxicological and Inorganic Chemistry of the Zaporizhzhya State Medical University in the laboratory of elemental analysis of organic compounds. Determination of the elemental composition of com-pounds was carried out using the elementar analyzer ELEMENTAR vario EL cube.
In this way, the anxiolytic properties of acids 4c, 4e and salts 5e, 5f (Table 2) were studied. According to the results of the research, it was found that in the conditions of the S. Pellow test after the introduction of the studied compounds there were no substances with anxiolytic action, which would be significantly higher than the reference drug gidazepam. However, sodium salt 5e in its action is approaching to gidazepam. And the rest of the studied substances have a pronounced anxiogenic effect.
Compound 5b. 0.01 mol of piperidine is added to 0.01 mol of 2 -((4-amino-5-methyl-4H-1,2,4-triazol-3-yl) thio) acetic acid (4a) in 30 ml of i-propanol and heat to dissolve. The solution is filtered, the filtrate is left at room temperature until the solvent evaporates. Obtain crystalline compounds of white colour, readily soluble in water, difficult to dissolve in chloroform.
2. The structure of synthesized compounds is established using modern physico-chemical methods of analysis.
3. Some physical and chemical properties of the obtained substances are investigated. 4. Under the conditions of the S. Pellow test after the introduction of the studied compounds, no substances with anxiolytic action were detected, which would significantly exceed the reference drug gidazepam.