Метод повышения эффективности индукции экспериментального андрогенеза сахарной свеклы в условиях in vitro

Аннотация

Цель и задачи исследования. Разработать метод повышения эффективности индукции экспериментального андрогенеза сахарной свеклы в условиях in vitro.

Материалы и методы. Исследования проводили в 2014–2017 гг. Исходным был селекционный материал Белоцерковской опытно-селекционной станции – тетраплоидные опылители и диплоидные семенники сахарной свеклы, генотипы селекционных номеров БЦ 45 К1 – К15, 1475 К1-25. Методы исследования биотехнологические, селекционные, физиологические, статистические.

Результаты. Исследовано влияние температурного режима и состава питательных сред, применяемых для предобработки эксплантов – стеблей с бутонами. В исследованиях использованы тетраплоидные опылители и диплоидные семенники сахарной свеклы, которые выращивали в полевых и лабораторных условиях. Экспланты культивировали in vitro при различных температурных режимах – от 4–10 °С до 20–25 °С на модифицированных агаризованных питательных средах. Лучшие результаты были получены при культивировании эксплантов в холодильной камере при температуре 4–10 °С при 16–часовом освещении 1,0–2,0 КЛК в течение 7–30 суток с использованием агаризованной питательной среды Мурасиге–Скуга, содержащей ½ дозы макроэлементов и полную дозу микроэлементов с добавлением витаминов по Гамборгу и аскорбиновой кислоты – 1 мг/л, аминокислот: глутаминовой – 250 мг/л, аспарагиновой – 30,0 мг/л, тирозина – 5 мг/л, аргинина – 3 мг/л, гидроксипролина –2 мг/л, регуляторов роста: 2,4–Д – 2,0 мг/л, 6-БАП – 0,6 мг/л и АБК – 0,3 мг/л, что способствовало увеличению количества полученных каллусов из пыльников с 1,8–2,1 % до 4,9–5,1 %, эмбриоидов – с 0,9–1,2 % до 6,1–6 3 % соответственно.

Выводы. Разработан метод повышения эффективности индукции экспериментального андрогенеза сахарной свеклы в условиях in vitro, включающий низкотемпературную предобработку эксплантов – стеблей с бутонами сахарной свеклы на модифицированной агаризованной среде Мурасиге–Скуга с добавлением витаминов, аминокислот, регуляторов роста и, в частности, АБК – 0,3 мг/л. Применение метода позволяет повысить выход каллусов более чем в два раза, а эмбриоидов – в 5-6 раз из пыльников сахарной свеклы in vitro, что обеспечит получение гаплоидных регенерантов для селекционных программ создания гомозиготных линий.