Визначення біологічно активних речовин у траві хвилівнику звичайного (Aristolochia clematitis l.) Методом верх та визначення антимікробної активності цієї сировини

Анотація

Вступ. Хвилівник звичайний (Aristolochia clematitis L.) – багаторічна трав’яниста рослина, яка відноситься до родини Хвилівникові (Aristolochiaceae). Наразі з приводу застосування хвилівнику звичайного в медицині є певні труднощі, які насамперед обумовлені побічними ефектами, зокрема нефропатією. Тому на сьогодні вченими з різних країн проводяться поглиблені наукові дослідження щодо дослідження хімічного складу та фармакологічної активності для розуміння безпечного застосування лікарських засобів на основі сировини рослин роду Хвилівник. Є позитивні результати з приводу визначення антимікробної та цитотоксичної активності рослин роду Хвилівник. Загалом, аналізуючи наукові джерела літератури, можна зробити висновок, що інформації стосовно хімічного складу та доведеної з наукової точки зору фармакологічної дії хвилівнику звичайного не достатньо. Метою роботи було визначення біологічно активних речовин у траві хвилівнику звичайного, заготовленої у фазу бутонізації та цвітіння, із використанням методу ВЕРХ. Також проведення скринінгового дослідження антимікробної активності означеної сировини. Матеріали та методи. Для дослідження використовували траву хвилівнику звичайного, заготовлену у фазі бутонізації та цвітіння в Україні в Харківській та Хмельницькій областях у травні-червні 2019-2020 рр. Хроматографічне вивчення досліджуваних зразків сировини проводили на рідинному хроматографі, обладнаному діодноматричним детектором Shimadzu HPLC-system, ser.20 в  таких умовах: колонка Phenomenex Luna C18, розміром 250 мм х 4,6 мм, розмір частинок 5 мкм; температура колонки – 350С; довжина хвилі детектування – 330 нм; швидкість потоку рухомої фази – 1 мл/хв; об'єм проби, що вводився – 5 мкл. Ідентифікацію компонентів проводили за часом утримування та відповідності УФ-спектрів речовині-стандарту. Для визначення антимікробної активності трави хвилівнику звичайного нами проведено скринінгове дослідження витяжок з даної сировини. Були одержані екстракти у співвідношенні сировина : екстрагент 1:10. Як екстрагенти використовували воду очищену та 50 %, 70 % та 96 % етанол. Визначення чутливості штамів мікроорганізмів визначали за відомою методикою методом колодязів із використанням середовища Мюллера-Хінтона. Оцінку антибактеріальної активності проводили за діаметром зон затримки росту: 10 мм – мікроорганізм не чутливий до досліджуваного екстракту; 10-15 мм – мікроорганізм слабочутливий до досліджуваного екстракту; 15-25 мм – мікроорганізм чутливий до досліджуваного екстракту; 25 мм та вище – мікроорганізм високочутливий до досліджуваного екстракту. У досліджені використовували такі штами мікроорганізмів: Staphylococcus aureus АТСС 25923, Escherichia coli АТСС 25922, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853, Bacillus subtilis АТСС 6633, Candida albicans ATCC 653/885. Результати дослідження. Експериментальне дослідження із використанням даних умов хроматографування дозволило виявити у досліджуваних об’єктах сполуки фенольної природи, а саме ферулову кислоту, кемпферол та рутин. Крім того, одночасно було встановлено наявність аристолохієвих кислот АА-І та АА-ІІ. Слід відмітити, що за якісним складом виявлених сполук трава хвилівнику звичайного, зібрана у фазу бутонізації, не відрізнялася від трави, заготовленої у фазу цвітіння. що антимікробна активність трави хвилівнику звичайного, зібрана у фазу бутонізації, та трава, зібрана у фазу цвітіння, значно між собою не відрізнялася. Однак, слід зазначити, що все ж таки дещо вищою вона була у трави, заготовленою у фазу цвітіння. Слід відмітити, що найбільш вираженою антимікробна активність була у витяжок, одержаних 70 % етанолом, найнижчою – водою очищеною. Такі мікроорганізми як Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa та Bacillus subtilis були високочутливими до дії витяжок з трави хвилівнику звичайного. Висновки. Таким чином, одержані результати щодо вивчення хімічного складу трави хвилівнику звичайного показують перспективність її подальшого поглибленого дослідження по вивченню сполук фенольної природи, а також визначенню їх кількісного вмісту. Крім того, скринінгове визначення антимікробної активності досліджуваних видів сировини дозволили виявити оптимальний екстрагент, а саме 70 % етанол та сировину – траву хвилівнику звичайного, зібрану у фазу цвітіння, які доцільно використовувати для подальшого вивчення. Висока антимікробна активність трави хвилівнику звичайного дозволяє припустити можливість використання екстрактів з неї у лікарських засобах для зовнішнього застосування. Ключові слова: Aristolochia clematitis L., хімічні речовини, ВЕРХ, антимікробна активність.

DOI: 10.5281/zenodo.5499700